بررسی بیان ایزوفرم های ژن ppar? ( ppar?1 و ppar?2 ) طی تمایز عصبی سلول های بنیادی موش

هدف تحقیق: بررسی بیان ایزوفرم های ژن ppar ?در سلول های بنیادی جنینی موش طی تمایز عصبی می باشد. روش تحقیق: ابتدا توسط نرم افزار beacon designer پرایمر های مناسب برای real time pcr تهیه شد. در ادامه کارایی پرایمرهای طراحی شده تعیین شد. سلول های بنیادی جنینی موش د رحضور رتینوئیک اسید (ra) به سمت عصب تمایز داده شد و در سه مرحله سلول های بنیادی جنینی (esc) ، اجسام شبه جنینی تیمار شده با رتینوئیک اسید (ebd6 ra+) و نورون rna استخراج و cdna سنتز شد. cdna سنتز شده برای بررسی بیان دو ایزوفرم ppar?1 و ppar?2 توسط تکنیک real time pcr استفاده شد. در ادامه روند تمایز در عدم حضور رتینوئیک اسید انجام شده و در اینجا نیز در سه مرحله esc ، اجسام شبه جنینی تیمار نشده با رتینوئیک اسید ((ebd6 ra- و beating body بیان ایزوفرم ppar?1 سنجیده شد. قابل ذکر است که در هر مرحله برای تائید نتایج real time pcr رنگ آمیزی و ایمنوسیتوشیمی انجام گردید. نتایج: طی تمایز عصبی افزایش معنی داری در سطح mrna از ppar?1 در مرحله ebd6 ra+ دیده شد و در نورون کاهش بیان را شاهد بودیم که این افزایش در سطح پروتئین نیز توسط داده های ایمنوسیتوشیمی تایید شد. هیچ گونه بیانی از ppar?2 در طی تمایز عصبی مشاهده نشد. در ادامه به منظور بررسی نقش رتینوئیک اسید در افزایش بیان ppar? روش تمایز در عدم حضور رتینوئیک اسید انجام شد که طی آن افزایش معنی داری در سطح mrna از ppar?1 در مرحله beating body نسبت به esc و ebd6 ra- دیده شد. کلمات کلیدی: ppar?، بیان ژن، تمایز عصبی، سلول های بنیادی جنینی موش (mesc)